proktolog w poznaniu

W celu dalszej walidacji prawidłowej funkcji kanału, skonstruowaliśmy mysie linie komórkowe ND7 / 23 oparte na DRG NaV1.9 i sfGFP-NaV1.9 stabilne DRG pochodzące od DRG, łącząc system Flp-In oparty na rekombinacji Flp (oparty na FRT) (Thermo Fisher) Naukowe) z intronowym wzmocnieniem ekspresji genów, techniką, która prowadzi do zwiększonej akumulacji mRNA i białka w stosunku do niezmienionego cDNA (44). Dodatkową korzyścią tego podejścia było zmniejszenie niepożądanych zdarzeń przegrupowania podczas propagacji cDNA kanału NaV w bakteriach. Mysi gen SCN11a jest kodowany przez 24 eksony o znanych granicach egzon / intron (45). Chociaż nie uzyskano wystarczającej ekspresji przy użyciu mysiego cDNA pozbawionego endogennego intronu lub z dodatkiem C-końcowego GFP (46), konsekwentnie widzieliśmy prąd NaV1.9 z cDNA zawierającym intron 2, który zwiększał się po różnicowaniu komórek ND7 / 23 w pożywka zawierająca NGF (100 ng / ml) i 1% FBS (Figura 1, F i G). RT-PCR i sekwencjonowanie potwierdziły prawidłowe wycięcie intronu 2 w celu utworzenia dojrzałych kanałów (45). Continue reading „proktolog w poznaniu”

lekarze pulmonolodzy katowice

U myszy WT transplantacja linii komórek nowotworowych pochodzących od TKO, w tym MDAC8, była związana z ogólnoustrojową ekspansją komórek odpornościowych, charakteryzującą się powiększonymi śledzionami i węzłami chłonnymi oraz wzrostem zarówno wrodzonych, jak i adaptacyjnych komórek odpornościowych; ta ekspansja była najbardziej widoczna wśród limfocytów B i granulocytów (Figura 4D i dane nie pokazane). Odkrycia te wskazują, że mediatory stanu zapalnego wydzielane przez guzy BALB / c TKO, w szczególności IL-6, służą do rekapitulacji korzystnego zapalnego mikrośrodowiska, w którym początkowo powstały nowotwory. Powalenie IL-6 w liniach komórek nowotworowych BALB / c TKO w płucach zmniejsza aktywację ERK i STAT3 i spowalnia wzrost nowotworu. Ze względu na konsekwentne wydzielanie IL-6 przez guzy BALB / c TKO postawiliśmy hipotezę, że IL-6 może działać jako autokrynny czynnik wzrostu w tym układzie. W celu bezpośredniej oceny znaczenia IL-6 do wzrostu nowotworu płuc BALB / c TKO, wygenerowaliśmy linie komórkowe trwale transfekowane wektorami lentiwirusowymi kodującymi shRNA skierowane przeciwko IL-6. Continue reading „lekarze pulmonolodzy katowice”

szpital psychiatryczny torun ul curie sklodowskiej

Sekrecja IL-6 została potwierdzona przez ELISA w panelu zawierającym kilka dodatkowych świeżo wyizolowanych nowotworów płuc BALB / c TKO i nie stwierdzono go na wysokich poziomach w innych zbadanych liniach komórek nowotworu myszy, w tym LL (Figura 4A i dane nie przedstawione). Co więcej, sekrecja IL-6 nie była zależna od makrofagów związanych z nowotworem, ponieważ IL-6 była łatwo wykrywalna w hodowlach nowotworów, w których niewielka populacja komórek CD11b + została usunięta (dane nie pokazane). Reasumując, odkrycia te sugerują model, w którym dysregulacja immunologiczna u młodych zwierząt, prawdopodobnie wynikająca z niedostatków wychwytu apoptotycznego za pośrednictwem MFG-E8, wywołuje zapalne mikrośrodowisko płucne bogate w IL-6 (23). W miarę rozwoju nowotworów selektywny nacisk sprzyja powstawaniu nowotworów o zdolności do autokrynnej produkcji IL-6; dowody wskazujące na silne selektywne ciśnienie do wytwarzania IL-6 przez komórki nowotworowe przedstawiono poniżej (Figura 5). Figura 4 Przeszczepione linie komórek nowotworowych BALB / c TKO wywołują silną odpowiedź gospodarza. Continue reading „szpital psychiatryczny torun ul curie sklodowskiej”

tychy przychodnie zdrowia

Podczas gdy myszy BALB / c TKO wykazywały nieznaczny wzrost całkowitej liczby komórek śledziony, co wskazuje na łagodne ogólnoustrojowe zapalenie, zapalenie w płucach było nieproporcjonalnie cięższe (Figura 3A i Dodatkowa Figura 2). Nawet w wieku 2 3 miesięcy myszy BALB / c TKO wykazywały ciężkie zapalenie płuc charakteryzujące się naciekami płucnymi, które zawierają komórki B i limfocyty T, granulocyty, makrofagi i komórki mieloidalne Gr-1 + CDllb + (Figura 3A). Te komórki Gr-1 + CD11b + wykazywały fenotyp powierzchniowy pokrywający się z mielinowymi komórkami supresorowymi, chociaż pozostaje ustalenie, czy te komórki mają prawdziwy fenotyp supresyjności. Rycina 3 BALB / c Guzy płuc TKO rozwijają się w kontekście zapalenia płucnego i ogólnoustrojowego. (A) Porównanie całkowitych leukocytów odzyskanych z płynu BAL z 3-miesięcznych myszy BALB / c TKO i WT (lewy panel) i analizę podtypów limfoidalnych i szpikowych (środkowy panel) przy użyciu cytometrii przepływowej. Continue reading „tychy przychodnie zdrowia”