Ponieważ neurony MrgprC11 + stanowią podgrupę populacji MrgprA3 +, użyliśmy myszy MrgprA3-GFPCretdTomato / + do wyizolowania neuronów DRG wyrażających receptory dla CQ i BAM8-22. Przeprowadziliśmy eksperymenty patch-clamp w obecności TTX (300 nM), który blokuje wszystkie podtypy kanałów NaV z wyjątkiem NaV1.8 i NaV1.9. Dodatkowo ustalono, że jony fluorkowe (F.) W pipecie pozwalają na częściowy rozdział obu prądów Na +, z NaV1.9 wykazując zwiększone prądy i większą aktywację hiperpolaryzowaną, podczas gdy NaV1.8 nie ma wpływu (56). Po zastosowaniu CQ zaobserwowaliśmy większą gęstość prądu w zakresach napięcia, w których aktywny jest tylko NaV1.9 (rys. 6, A i B oraz tabela 2). Ponadto, zauważyliśmy 15-mV hiperpolaryzujące przesunięcie napięcia aktywacji kanału prądu TTX-R Na + (Figura 6C). Chociaż widzieliśmy znacznie większą gęstość prądu NaV1.9 (Figura 6D), obserwowaliśmy zmniejszone gęstości prądu Na + przy bardziej napięciach depolaryzowanych, w których prąd Na + jest głównie napędzany przez NaV1,8 (Figura 6, E i F, i Tabela 2). Po zastosowaniu BAM8-22 (10 .M) zaobserwowaliśmy podobne nasilenie prądu w gęstości prądu NaV1.9 przy większych potencjałach hiperpolaryzowanych (Figura 6, G, H i J), ale nie ma znaczących różnic w gęstości prądu NaV1,8 (Figura 6, H, K i L oraz Tabela 2). Zastosowanie BAM8-22 również doprowadziło do hiperpolaryzowanego przesunięcia 11,5-mV napięcia aktywacji prądu TTX-R (Figura 6I). Wreszcie, CQ i BAM8-22 przyspieszyły aktywację NaV1.9, ale nie aktywację NaV1.8 (dodatkowa Figura 3). Figura 6 Zastosowanie CQ, BAM8-22 i histaminy prowadzi do nasilenia prądu NaV1.9 i przesunięcia napięcia aktywacji prądu TTX-R. Zapis napięcia i zacisku z MrgprA3-CretdTomato / + DRGs. (A) Wskaźnik prądu próbki przy. 70 mV pokazuje, że aplikacja CQ wzmacnia prąd NaV1.9. (B) Relacja prąd-napięcie (IV) prądu odpornego na TTX (TTX-R) przed i po zastosowaniu CQ. (C) Wykres napięciowo-napięciowy (GV) dla prądu TTX-R pokazuje hiperpolaryzowane przesunięcie 15,7-mV napięcia aktywacji (n = 9, P = 0,002). (D) Gęstość prądu NaV1.9 (pA / pF) jest wyższa po CQ (n = 9, P = 0,004). (E i F) Ślad próbki NaV1.8 wykazuje spadek gęstości prądu po podaniu CQ (n = 9, P = 0,005). (G) Obecny ślad przy. 70 mV pokazuje większą gęstość prądu NaV 1.9 po BAM8-22. (H) IV dla prądu TTX-R przed i po BAM8-22. (I) GV dla prądu TTX-R pokazuje hiperpolaryzowane przesunięcie 11,5-mV w aktywacji po zastosowaniu BAM8-22 (n = 9, P = 0,012). (J) Gęstość prądu NaV1.9 jest wyższa po BAM8-22 (n = 9, P = 0,049). (K i L) Natężenie prądu i natężenie NaV1.8 nie wykazuje różnic przed i po podaniu BAM8-22 (n = 9, P = 0,68). (M) Obecny ślad przy. 60 mV wykazuje umiarkowane wzmocnienie NaV1.9 po podaniu histaminy. (N) IV dla TTX-R przed i po podaniu histaminy. (O) GV dla prądu TTX-R po histaminie pokazuje hiperpolaryzowane przesunięcie napięcia aktywacji 6,5 mV (n = 10, n = 0,029). (P) Natężenie prądu NaV1.9 nie wykazuje znaczącej zmiany po dodaniu histaminy (n = 10, P = 0,14). (Q i R) Natężenie prądu i natężenie NaV1.8 nie wykazuje różnic przed i po zastosowaniu histaminy (n = 9, P = 0,41). Widoczne są prądy NaV1.9 i NaV1.8 przed (czarnym) i po (czerwonym) zastosowaniu związku. * P <0,05, ** P <0,01. Do wszystkich analiz użyto testu 2-ogonowego, niesparowanego i sparowanego ucznia. Dane reprezentują średnią. SEM. Wartości są podane w tabeli 2. Tabela 2 Wpływ pruritogenu na biofizyczną charakterystykę prądów TTX-R w MrgprA3 + DRG Stwierdzono rozległe nakładanie się neuronów reagujących na CQ i histaminę (9). Zbadaliśmy więc, czy zastosowanie histaminy (100 .M) wpłynęło na prądy TTX-R w neuronach MrgprA3 + (tdTomato +) [podobne: kłykciny kończyste leczenie, kalarepa kalorie, kora debu ]
Random entries
Obustronna wrodzona wada tętniczo-żylna nerek
43-letnia kobieta wykazywała duszność przy umiarkowanym wysiłku i obustronnych bruzdach. Pacjent nie miał historii traumy. Echokardiografia ujawniła przerost lewej komory i powiększoną żyłę główną dolną. Badanie kolorowego Dopplera (panel A)… Read More Obustronna wrodzona wada tętniczo-żylna nerek
proktolog w poznaniu
DevURLW celu dalszej walidacji prawidłowej funkcji kanału, skonstruowaliśmy mysie linie komórkowe ND7 / 23 oparte na DRG NaV1.9 i sfGFP-NaV1.9 stabilne DRG pochodzące od DRG, łącząc system Flp-In oparty na… Read More proktolog w poznaniu
Tags
bogowie cda
kalafior wartości odżywcze
kalarepa kalorie
kalprotektyna
kardiowersja elektryczna
klasterowe bóle głowy
klasyfikacja icd 10
kminek właściwości
kolano budowa
kolka nerkowa icd 10
kolka nerkowa objawy
kora debu
kozieradka zastosowanie
krążek międzykręgowy
kłykciny kończyste leczenie
martwa cisza cda
mcz lubin
olx myślenice
olx parczew
olx sulechów
uxtorpeda allegro