lekarze pulmonolodzy katowice

U myszy WT transplantacja linii komórek nowotworowych pochodzących od TKO, w tym MDAC8, była związana z ogólnoustrojową ekspansją komórek odpornościowych, charakteryzującą się powiększonymi śledzionami i węzłami chłonnymi oraz wzrostem zarówno wrodzonych, jak i adaptacyjnych komórek odpornościowych; ta ekspansja była najbardziej widoczna wśród limfocytów B i granulocytów (Figura 4D i dane nie pokazane). Odkrycia te wskazują, że mediatory stanu zapalnego wydzielane przez guzy BALB / c TKO, w szczególności IL-6, służą do rekapitulacji korzystnego zapalnego mikrośrodowiska, w którym początkowo powstały nowotwory. Powalenie IL-6 w liniach komórek nowotworowych BALB / c TKO w płucach zmniejsza aktywację ERK i STAT3 i spowalnia wzrost nowotworu. Ze względu na konsekwentne wydzielanie IL-6 przez guzy BALB / c TKO postawiliśmy hipotezę, że IL-6 może działać jako autokrynny czynnik wzrostu w tym układzie. W celu bezpośredniej oceny znaczenia IL-6 do wzrostu nowotworu płuc BALB / c TKO, wygenerowaliśmy linie komórkowe trwale transfekowane wektorami lentiwirusowymi kodującymi shRNA skierowane przeciwko IL-6. Zbadano panel 5 shRNA i wybrano dwa, reprezentujące najmniej (KD-1) i większość (KD-2) konstruktów efektywnych do ekstensywnej oceny (Figura 5A i dane nie pokazane). Wiadomo, że IL-6 aktywuje sygnalizację MAPK i STAT3, a aktywacja obydwu tych szlaków bierze udział w rozwoju nowotworu w różnych układach (16). Wcześniej wykazaliśmy wysoki poziom pERK1 / 2, docelowego w dół w szlaku MAPK, w pierwotnych nowotworach BALB / c TKO (Figura 2G); zgodny z ważną rolą IL-6 w aktywacji tej ścieżki w guzach płuc BALB / c TKO, zniesienie IL-6 było związane ze znacznym zmniejszeniem poziomów pERK1 / 2 (Figura 5B). Ponadto poziomy jądrowego STAT3 były również obniżone w guzach z knockdown IL-6, wskazując na rolę autokrynnej IL-6 w obu szlakach (Figura 5B). W komórkach eksprymujących KD-2 zmniejszenie obu szlaków sygnałowych było związane ze zmniejszoną zdolnością wzrostu w hodowli (brak kierowania shRNA vs. KD-2: P <0,0001) (Figura 5C). Po przeszczepieniu na 6- do 8-tygodniowe myszy BALB / c TKO, guzy wykazujące ekspresję KD-2y wykazywały zmniejszenie wzrostu (niedotyczące shRNA vs. KD-2: P = 0,005), co odpowiadało polepszeniu przeżywalności u myszy niosących te guzy (nie kierowania shRNA vs KD-2: P = 0,02) (Figura 5D). Ponadto, komórki wyizolowane z nowotworów pochodzących z KD-2B hodowanych in vivo wykazały zasadniczą reaktywację sekrecji IL-6, prawdopodobnie odzwierciedlając połączenie ekspansji komórek wyrażających niskie poziomy konstruktu knockdown i infiltrację guza przez gospodarza wydzielającego IL-6.. komórki (Figura 5E). Knockdown IL-6 był związany ze zmiennymi zmianami w cytokinie pochodzącej od guza i wydzielaniu chemokin (Suplemental Figura 4). Wydzielanie VEGF było znacząco zwiększone w komórkach wyrażających KD-2y, podobnie jak wydzielanie zapalnych chemokin MCP-1 i LIX. Natomiast zarówno IP-10, jak i MIP-1. były zmniejszone w związku z wybijaniem IL-6 (dodatkowa Figura 4). Nie stwierdzono znaczących zmian w wydzielaniu MIP-1 (3, MIP-2 lub KC. Chociaż specyficzne skutki tych zmian w sekrecji cytokin są trudne do określenia, knockdown IL-6 wyraźnie ma negatywny wpływ na wzrost guza zarówno in vitro, jak i in vivo. Istotny wzrost wydzielania VEGF przez komórki z komórkami typu knockdown może przeciwdziałać niektórym ograniczającym wzrost efektom knockdown IL-6 in vivo poprzez wzmocnioną angiogenezę; jednak wykazano również, że VEGF ogranicza inwazję guza i przerzuty (34, 35). Wyniki te wskazują na rolę IL-6 w optymalnym wzroście guza i dodatkowo wskazują na onkogenne zapalenie w rozwoju guzów BALB / c TKO. Wykazano, że podobna autokrynna sygnalizacja IL-6 odgrywa kluczową rolę w ludzkich guzach płuc wyrażających EGFR; w tym systemie przekazywanie sygnału przez EGFR prowadziło do wydzielania IL-6 i do aktywacji szlaków MAPK i STAT3 (15) [więcej w: kora debu, kłykciny kończyste leczenie, mcz lubin ]