Generowanie przeciwciał monoklonalnych na ludzkim klonie naturalnych zabójców. Charakteryzacja dwóch naturalnych antygenów związanych z zabójcą, NKH1A i NKH2, ulegających ekspresji w podgrupach dużych granularnych limfocytów.

Wstępna charakterystyka dwóch przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko antygenom selektywnie eksprymowanym na dużych ziarnistych limfocytach (LGL) jest opisana w niniejszym dokumencie. Te dwa odczynniki, anty-naturalny zabójca (NK) H1A i anty-NKH2, otrzymano po immunizacji komórek śledziony myszy sklonowaną ludzką linią komórek NK określaną jako JT3. W świeżej ludzkiej krwi obwodowej zarówno przeciw-NKH1A, jak i przeciw-NKH2 selektywnie reagowały z komórkami, które pojawiły się morfologicznie jako duże ziarniste limfocyty. Jednakże, badania lizy dopełniacza i dwukolorowa analiza fluorescencji wykazały, że niektóre LGL eksprymują oba antygeny i inne komórki wyrażające tylko NKH1A lub NKH2. Analiza funkcjonalna tych podzbiorów wskazała, że populacja komórek NKH1A + zawiera całą pulę aktywnych limfocytów NK, podczas gdy ekspresja antygenu NKH2 wydaje się wyznaczać unikalną subpopulację LGL, która w stanie spoczynku wykazuje niski stopień spontanicznej cytotoksyczności. Ekspresję NKH1A i NKH2 badano również, stosując serię dziewięciu dobrze scharakteryzowanych ludzkich klonów NK. Stwierdzono, że wszystkie klony NK są NKH1A +, a cztery z dziewięciu także ulegają ekspresji NKH2. Wyniki te silnie potwierdziły pogląd, że NKH1A jest antygenem związanym z pan-NK i wskazał, że co najmniej część klonowanych NKH2 + LGL jest silnie cytotoksyczna. Wykazano, że anty-NKH1A ma taką samą specyficzność jak uprzednio opisane przeciwciało N901 i został tu znaleziony do wytrącenia cząsteczki 200000-220 000-molowych w analizie elektroforezy na żelu poliakryloamidowym z SDS (PAGE). Anty-NKH2 był specyficzny dla struktury, która migruje przy 60 000 molowych wagach w analizie SDS-PAGE w warunkach redukujących. Dwukolorowa analiza immunofluorescencyjna NKH1A, NKH2 i innych antygenów związanych z NK (Leu7 i B73.1) wykazała zmienne stopnie koekspresji tych antygenów, które potwierdziły, że NKH1A i NKH2 definiują odrębne struktury powierzchni komórki. Anty-NKH1A i anty-NKH2 wydają się być przydatnymi odczynnikami do charakteryzowania LGL obecnych w ludzkiej krwi obwodowej i do identyfikacji funkcjonalnie istotnych podzbiorów w obrębie tej heterogenicznej populacji limfocytów cytotoksycznych.
[hasła pokrewne: kminek właściwości, uxtorpeda allegro, kalarepa kalorie ]